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琼脂糖预制胶电泳试剂盒是一种非常适合核酸PCR实验、酶切反应实验等的一种可以直接进行核酸凝胶电泳实验的试剂盒,电泳实验效率大大提高,可以节约大量时间。 此款琼脂糖电泳试剂盒跟其它琼脂糖试剂盒有区别,因此使用方法也有一些区别,不需要再四处采购琼脂糖、核酸染料、电泳液和loading buffer等试剂;而且琼脂糖预制胶是经过核酸染料预染的,既不用进行繁琐的制胶,也不用电泳液染色或后染色,即开即用;再加上配备的高压快速电泳液,电泳速度远远快与传统的TAE或TBE电泳液。 使用方法: 在低温条件下高压快速电泳有时会有结晶析出,请65℃水浴加热溶解,用去离子水稀释100倍,用作电泳液,倒入电泳槽中。本产品配置的电泳液可重复使用两三次,如果大电泳槽次数更多。 取出琼脂糖凝胶,剪刀剪开,标签面即孔突出面朝上,公测端为负极,放入高压快速电泳液中,没过胶面1mm,如有孔内有气泡,设法除去。 在DNA样品中加入1µl的6× loading buffer混匀,用移液器将混合液缓慢加入凝胶加样孔,同时加入Marker。 开启电源,红色为正极,黑色为负极,注意DNA样品有负极向正极电泳移动。 根据迁移距离及指示剂迁移的位置,判断是否终止电泳。 电泳完毕,关电源,将凝胶放在成像仪中观察电泳条带及其位置,并与Marker比较被扩增产物的大小。 韵邦生物作为一家专业从体外诊断试剂原料、生物缓冲剂、生物清洗剂、医药原料中间体及精细化学品研发、生产和销售于一体的高新技术企业,韵邦提供大量现货:生物缓冲剂包括 Tris,Bicine,HEPES,BIS-TRIS,TES,MOPS等,能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,如果您需要了解更多关于生物缓冲剂的内容,请访问韵邦官网,网址:www.ybapi.com。 备注:该信息来源网络转载如有侵权或雷同请联系我们删除。
腺苷脱氨酶(EC:3.5.4.4 adenosine deaminase ADA)是一种氨基水解酶,也是嘌呤核苷代谢中重要的酶类,属于巯基酶,每分子至少含2个活性巯基,其活性能对氯汞甲酸完全抑制。ADA通过脱氨作用特异性催化腺嘌呤核苷生成次黄嘌呤,后者再通过一系列的化学反应最终生成尿酸排出体外。它是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶,广泛分布于人体组织和细胞中,以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高,肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。血液中ADA主要存在于红细胞、粒细胞和淋巴细胞,其活性约为血清的40~70倍,T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活性更高。 ADA(腺苷脱氨酶)与临床多种疾病密切相关,其活性的升高与降低从一定程度上反映着疾病的发生、发展与预后情况,对以上相关疾病的诊断、鉴别、病情的监测、临床治疗情况有着重要的参考价值。 1.结核病诊断 鉴别结核性和非结核性胸、腹水及脑脊液是临床病因学诊断的一个常见难题。结核菌感染人体虽然能产生抗体,但无保护作用,其抗感染免疫主要靠细胞免疫。细胞免疫作用是结核菌激活T淋巴细胞使其产生增殖,随之引起巨噬细胞的活化,活化的巨噬细胞内溶酶体酶大量增多,增强对细胞内结核菌的杀伤作用。 2.肿瘤诊断 利用检测T淋巴细胞ADA活性,能够作为表面标志物辅助淋巴细胞白血病和淋巴瘤的诊断和分型。有关资料证实,急性淋巴细胞性白血病的T淋巴细胞活性增强,而慢性淋巴细胞性白血病和何杰金氏淋巴瘤患者外周血T淋巴细胞ADA无明显变化。 3.艾滋病(AIDS)的诊断 1987年Delia提出,在检测无症状AIDS高危人群时,ADA活性测定与检测AIDS相关逆转录病毒抗体可协同作为AIDS的诊断标志。获得性免疫综合征,无特征淋巴细胞中ADA和PNP均比健康对照组有显著性增高,在半数无症状AIDS高危个体的RBC中ADA活性显著增高加。 4.其他疾病的诊断 除对上述疾病的鉴别诊断外,在另一些能刺激细胞免疫系统的疾病(如伤寒、传染性单核细胞增多症、布鲁氏菌病、风湿热、溶血性贫血)的血清中,ADA也出现增高现象。此外,ADA鉴别胆汁淤积原因和诊断急慢性肝炎、肝硬化等有一定的价值。在反映急性肝病残存病变或慢性肝损害程度方面,如结核患者服用抗痨药物最常见引起肝损害,ADA较ALT敏感,并且可作为非甲非乙型肝炎的标记。 韵邦生物作为一家专业从体外诊断试剂原料、生物缓冲剂、生物清洗剂、医药原料中间体及精细化学品研发、生产和销售于一体的的高新技术企业,韵邦提供大量现货:生物缓冲剂包括 Tris,Bicine,HEPES,BIS-TRIS,TES,MOPS等,能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,如果您需要了解更多关于生物缓冲剂的内容,请访问韵邦官网,网址:www.ybapi.com。 备注:该信息来源网络转载如有侵权或雷同请联系我们删除。
生物缓冲液通常是许多生产实验领域中不可缺少的一种调节剂,在加入一定量其他物质时可以减缓pH的改变。生物缓冲剂在出厂时通常以粉末形式存在,市面上也不乏有配置成溶剂再出售的厂家。但是相比粉末而言,溶剂无论是在运输还是储存的过程中,都不如粉末方便。下面就具体来了解一下关于缓冲液的相关知识。 高品质缓冲液须具备的特点 1、水溶性好,配置简单; 2、产品纯度高,化学稳定性好; 3、在所需pH范围内较高的缓冲能力; 4、与分析和实验应用条件具有良好的兼容性; 5、与其他溶质具有良好的兼容性。 市面上生物缓冲液有几十种。具有接近中性的pKa值的是zui受市场欢迎的,下面列举举常用的3种缓冲剂作介绍。 磷酸盐缓冲液:PH值范围在5.8到8.0之间。它的优点是PH值不会随温度的变化而变化。并且价格便宜,对紫外无无明显吸收; Mops缓冲液: PH值在6.5-7.9之间,它的优点是稳定性好,在生理PH范围内具有较高的缓冲能力; Tris缓冲液: PH值在7.2-9.0对紫外线无明显吸收,价格相对来说也比较便宜,缓冲范围广,可用于多种生产、实验中。 韵邦生物作为一家专业从体外诊断试剂原料、生物缓冲剂、生物清洗剂、医药原料中间体及精细化学品研发、生产和销售于一体的高新技术企业,韵邦提供大量现货:生物缓冲剂包括 Tris,Bicine,HEPES,BIS-TRIS,TES,MOPS等,能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,如果您需要了解更多关于生物缓冲剂的内容,请访问韵邦官网,网址:www.ybapi.com。 备注:该信息来源网络转载如有侵权或雷同请联系我们删除。
生物缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时保持溶液的pH值相对稳定的溶液,多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动,需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。在生化研究工作中,常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。 让我们来看看常用的生物缓冲液,以及它们的特点: 1. 磷酸盐缓冲液 磷酸盐缓冲液是应用最广泛的缓冲液。由于其二次离解作用,缓冲液pH值范围较宽,可配置不同pH值的酸性、碱性和中性缓冲液: 制备酸性缓冲液可直接使用NaH2PO4或KH2PO4, pH值范围为1~5; 碱性缓冲液可直接使用Na2HPO4或K2HPO4, pH范围为9~12; 中性缓冲液中含有等量的NaH2PO4和Na2HPO4或等量的KH2PO4和K2HPO4溶液,pH值为5.5~8.5。 优点:①易于配制成各种浓度 ;②pH值范围宽;③pH受温度的影响小; 缺点:①易与常见的钙、镁、重金属离子形成沉淀;②抑制某些生化过程; 2. Tris缓冲液 Tris缓冲液在生物化学研究中有着广泛的应用。它是弱碱,通常在“中性”范围内使用。Tris-HCl缓冲:pH = 7.5 ~ 8.5;三磷酸缓冲液:pH = 5.0 ~ 9.0。 除TRIS - hcl外,TRIS还有多种衍生化缓冲: TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl,常用来清洗免疫染色组织或Western blotting中的Western blotting膜; TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,一种常用于Western Blotting的膜缓冲液; TE=Tris-HCl+EDTA,对DNA碱基具有保护作用,常用于DNA的稳定和储存; TAE=Tris碱+乙酸+EDTA,是一种广泛应用于短片段DNA电泳的缓冲体系; TBE=三碱基+peng酸+EDTA,适用于长期DNA电泳,对小片段有较好的分离效果。 优点: ①因为Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液;②对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。 缺点:①缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1;②温度效应大,温度变化对缓冲液pH值的影响很大,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。 ③易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。④此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。 3. Good’s缓冲液 在 1960 年代中期,N.E.Good鉴于一般的缓冲液系统并不适合生化实验所使用,必须用人为设计和人工合成的方法来找到专门用于生命科学研究的特定的缓冲体系,这些缓冲体系们都具有以下特质: 1.pKa 在6~8 之间;2.在水溶液中有高溶解度;3.盐效应很小;4.不易被运送通过细胞膜;5.不易受温度、离子组成、浓度等因素影响解离度;6.不会与金属离子形成错合物,或错合物不沉淀、不干扰生物活性;7.化学性质稳定。 Good’s缓冲液的主要优点是不参加和不干扰生物化学反应过程,对酶化学反应等无抑制作用,所以它们专门用于细胞器和极易变性的、对pH敏感的蛋白质和酶的研究工作。 其缺点是:①价格昂贵,②对测定蛋白质含量的双缩脲法和Lowry法不适用,因为它们会使空白管的颜色加深。 4.甘氨酸缓冲液 甘氨酸缓冲液pH值范围广,应用范围广。pH值范围为2.0~11.0。最常见的体系和pH值范围如下表所示: 甘氨酸缓冲液 pH值范围 甘氨酸-HCl 2.0~5.0 甘氨酸-NaOH 8.0~11.0 甘氨酸-Tris 8.0~11.0 甘氨酰胺缓冲液 7.8~8.8 甘氨酰甘氨酸缓冲液 8.0~9.0 优点:为细胞成分和各种提取物提供更亲近的自然环境。 缺点:类似于磷酸盐缓冲体系;干扰某些生化反应过程,例如代谢过程。 韵邦生物作为一家专业从体外诊断试剂原料、生物缓冲剂、生物清洗剂、医药原料中间体及精细化学品研发、生产和销售于一体的高新技术企业,韵邦提供大量现货:生物缓冲剂包括 Tris,Bicine,HEPES,BIS-TRIS,TES,MOPS等,能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,如果您需要了解更多关于生物缓冲剂的内容,请访问韵邦官网,网址:www.ybapi.com。 备注:该信息来源网络转载如有侵权或雷同请联系我们删除。