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制备酸性缓冲液可直接使用NaH2PO4或KH2PO4, pH值范围为1~5;
碱性缓冲液可直接使用Na2HPO4或K2HPO4, pH范围为9~12;
中性缓冲液中含有等量的NaH2PO4和Na2HPO4或等量的KH2PO4和K2HPO4溶液,pH值为5.5~8.5。
TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl,常用来清洗免疫染色组织或Western blotting中的Western blotting膜;
TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,一种常用于Western Blotting的膜缓冲液;
TE=Tris-HCl+EDTA,对DNA碱基具有保护作用,常用于DNA的稳定和储存;
TAE=Tris碱+乙酸+EDTA,是一种广泛应用于短片段DNA电泳的缓冲体系;
TBE=三碱基+peng酸+EDTA,适用于长期DNA电泳,对小片段有较好的分离效果。
优点: ①因为Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液;②对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
缺点:①缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1;②温度效应大,温度变化对缓冲液pH值的影响很大,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。 ③易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。④此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。
甘氨酸缓冲液
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pH值范围
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甘氨酸-HCl
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2.0~5.0
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甘氨酸-NaOH
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8.0~11.0
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甘氨酸-Tris
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8.0~11.0
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甘氨酰胺缓冲液
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7.8~8.8
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甘氨酰甘氨酸缓冲液
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8.0~9.0
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