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1,3-双(三(羟甲基)甲氨基)丙烷,简称BIS-TRIS,它是TRIS缓冲剂的衍生物,也是一种高效螯合PH缓冲剂。Bis-Tris可以识别在细胞蛋白质中最容易受到铅离子竞争的钙离子结合位点。
Bis-Tris缓冲液
正二价铅离子是一种异生金属离子,暴露的铅离子对环境,人体都有一定的危害。幼儿接触后会造成急性或慢性中毒,甚至会产生不可逆转的神经损伤。所以找到对铅离子攻击脆弱的蛋白结合位点至关重要。在 MES 缓冲液等非螯合环境中,鉴定这些蛋白质上生理相关的铅离子结合位点具有挑战性,因为铅离子相互作用既可以是特异性的,也可以是机会性的,并且通常表现出比天然金属离子更高的亲和力。
螯合剂 Bis-Tris 可用来探测高亲和力铅离子位点并确定其特定功能作用。Bis-Tris 有五个羟基和一个叔胺基,所有这些都可能作为多种二价金属离子的配体。Bis-Tris与 EDTA 等其他强螯合剂相比,它与铅离子形成较弱但稳定的络合物。此外,Bis-Tris 是一种高度适应性的螯合剂,因为其参与金属离子配位的官能团数量可能会因所提供的竞争配体的存在而异,例如,通过蛋白质、脂质或其他小分子。使用 Bis-Tris 不仅能够区分高亲和力和低亲和力铅离子位点。在金属结合研究中使用螯合 pH 缓冲液Bis-Tris可以为金属蛋白的机制提供有价值的见解。Bis-Tris 不仅不影响铅离子与高亲和力位点的结合,还为蛋白质结合的金属离子提供了额外的配体。但非螯合 MES 缓冲液与结合位点有弱相互作用。从铅离子毒性的角度来看,在 Bis-Tris 类螯合剂和代谢物丰富的细胞环境中,铅离子复合物的膜相互作用不太可能发生。
除了在金属铅方面的应用,Bis-Tris缓冲剂的其它应用也很广泛。
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