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缓冲溶液Bicine的pH值的决定性因素有哪些?

发布时间: 2022-03-18

生物缓冲液通常是生化检测和生物实验中使用非常普遍的一种辅助试剂,例如:Bicine,Bicine缓冲剂具有维持体系pH值稳定,确保反应进行、促进酶的活性及蛋白核酸结构稳定等特性。其中一个关键性作用就是对体系酸碱度的改变起到缓冲,这时Bicine缓冲液的PH值就会变得格外重要,但有时会因为一些因素的影响改变PH值,这时就需要特别去注意一下它的PH值是由什么来决定的?

 

一、PH值由pKa决定

Bicine缓冲液PH值的大小是由构成缓冲剂的共轭酸碱对的pKa以及缓冲比共同决定,但是pKa起决定性作用,缓冲比起到的影响较小。因此在配制成缓冲溶剂后,在未确定选用何种缓冲剂的情况下,首先需要根据所需的PH值查找对应缓冲范围的缓冲剂,缓冲剂的pKa与所需pH值越接近越好。此外,还需注意缓冲剂对体系反应是否产生不良反应,如果碰上多种缓冲剂PH值符合要求,可选择溶解性好,无毒无害,稳定性强且易储存的缓冲液。

 

二、PH值由调节缓冲比来决定

如果是确定了缓冲剂,其PH值的改变有时会受缓冲比调节的影响,例如Bicine的PH值升高就会增加氢氧化钠比例,pH降低则会增加Bicine比例。

 

三、PH值由缓冲液浓度、离子强度及渗透压决定

缓冲溶液的浓度越大,其缓冲效果自然更佳,缓冲能力更强,但需要注意的是并非浓度越高越好,在确定配制缓冲溶液时,PH值也会受到总浓度的影响,以及需要考虑离子强度及渗透压对反应体系的影响。

上述三点是决定Bicine缓冲溶液PH值范围的关键因素,使用过程中需要多加注意。

 

 

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