在实验中使用生物缓冲剂的要求有哪些？

发布时间: 2023-03-09

缓冲溶液作为重要的实验溶液，经常会在各大生物实验操作中出现，其主要作用就是对反应体系的PH值有平衡作用，作为受青睐的溶液之一，在实验中选择使用时也有很多条件限制。所以接下来，就具体给大家谈一谈实验中使用缓冲液的选择要求。

一、生物缓冲剂pH值的选择

实验中的缓冲范围必须要符合反应体系的pH值才能保证实验结果的准确性以及避免操作过程中出现干扰性，缓冲范围的pH值通常取决于电离解数pKa值，但是pKa值又和盐或酸浓度有关，所以常根据公式来进行计算。理论上缓冲范围PH值在9.4-11.7之间，但在实际的实验中为了保证准确度，通常会采用pH值在9.7-11.7之间的缓冲液，例如：CAPS缓冲液。有时可能也会根据实验目的，使用其它范围的pH值，但都需要进行选择，不能完全使用同一种范围的pH。

二、电离平衡常数及缓冲范围要求

有很多测定实验中会要求反应溶液的PH值稳定在一定的范围内，以保证实验进程不发生变化，通过加入一定量的缓冲液，达到中和，使得缓冲范围控制在所需要的范围内。另外，有时在采用电位滴定法测定时，需要不同配比且是同一种缓冲液的滴定曲线，这时对于电离平衡常数也有要求，需要特别注意。

三、生物缓冲剂的使用限制条件

通常情况下，缓冲范围合理，符合反应体系，就需考虑反应体系的限制性条件，例如：PBS缓冲液会络合金属离子钙，酶等，而有些反应体系中酶或蛋白质活性却受到金属离子的影响，这时就不能使用此种缓冲液。另外，还有一些其它类型的缓冲液也是需要根据实验测定目的来使用，并非使用一种缓冲液适用于所有的生物实验。

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