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利用化学发光法达到实验检测目的成为了很多实验人员的常规操作,其中将发光和分析法两者联合起来,具有其它发光试剂不可比拟的优势。而反应过程就是通过发光试剂,如鲁米诺、吖啶酯或碱性磷酸酶等来与抗体抗原标记,待测物质与标记后的抗原经过反应后,然后进行测定发光强度,就可知道待测物质的含量。
不过这需要注意化学发光试剂的质量,像吖啶酯和碱性磷酸酶是使用较多的试剂,但也有人会质疑这两种试剂,到底哪一种好呢?其实这主要和它们的性能分不开。下面具体给大家分析一下。
在发光体系中有直接发光也有间接发光,前者是直接利用发光分子达到实验要求,例如吖啶酯。而后者具有代表性的就是酶促发光,利用试剂就有碱性磷酸酶与抗体抗原进行偶联,待产生免疫反应后,通过酶催化底物发光。
从发光形式上来看,吖啶酯和碱性磷酸酶就存在很大的差异性: 吖啶酯在过氧化氢溶液和氢氧根的反应下水解发光,其发光在0.5秒时就可以达到高峰,1秒以内可以发光完成,属于闪光型,并且对于各项检测仪器要求很高,要求在1秒内完成读数。
碱性磷酸酶是酶底物发光,一旦进入发光平台,可以持续进行发光,但是其劣势就是需要进行孵育反应一段时间以后,其发光才能达到峰值,与吖啶酯1秒的发光时间比较而言,发光速度上会有限制。
所以从上面两个角度来看,吖啶酯的优势显而易见,它也是大多数公司的选择,这样不仅可以保证灵敏度,且有效提高检测速度。
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